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溶解DNA和鉴定DNA时为什么要溶于不同浓度的氯化钠溶液

来源:学生作业帮 编辑:大象学习网作业帮 分类:综合作业 时间:2021/07/29 06:15:12
溶解DNA和鉴定DNA时为什么要溶于不同浓度的氯化钠溶液
既然目的都是溶解,为什么不是两次都用同浓度的,都是0.015或2mol/L?
还有溶于水可不可以?
PS:请看清楚是溶解和鉴定时.不要回答是为了析出DNA!析出浓度是0.14mol/L!知道上好多人的回答是错的!很多网友的提问都关闭了!
个人认为氯化钠浓度大是有利于DNA溶解的,2的时DNA的溶解度最大,2mol/L溶解度最大 便于去得大量的DNA,过滤去除杂质,再稀释至0.14mol/L 提纯,你直接加0.14mol/L是能析出 但杂质会很多!
同时你作为鉴定的DNA盐离子的浓度过高也是会导致你的dna的质量不行滴~虽然DNA的浓度虽氯化钠溶液浓度的增加(从零开始)先减小(当氯化钠溶液浓度达到
0.14mol/L时达到最小值)然后再上升,但还要注意一点就是:钠离子浓度过高的话会与DNA分子发生络合反应.所以鉴定DNA时若要用氯化钠溶液作溶剂,就要做到既使DNA分子溶解度高,又要避免两者发生络合反应影响DNA分子的鉴定.0.015mol/L的氯化钠溶液正好可以做到这两点,那就选它了.
还有是可以溶于水的~
再问: O(∩_∩)O谢谢,明白了! 但是"2mol/L溶解度最大 便于去得大量的DNA,过滤去除杂质,再稀释至0.14mol/L 提纯," 你的意思是加入2mol/L后还得过滤,然后再稀释析出?好像书上没有过滤这一步……
再答: 1.材料制备 0.1G/ml柠檬酸钠100ml 500ml烧杯→玻璃棒搅拌→1000r/min离心2min→吸去上清液→ 活鸡血180ml 即得鸡血细胞液(也可将上述烧杯置于冰箱中,静置一天使鸡血细胞自行沉淀) 2.方法步骤 取血细胞液5-10ml+20ml蒸馏水,玻璃棒沿一个方向快速搅拌 (1)提取血细胞核物质 纱布过滤,滤液中含DNA和其他核物质,如蛋白质 原理:血细胞的细胞膜、核膜吸水胀破,玻璃棒快速搅拌机械加速血细胞破裂 (2)溶解核内DNA:滤液+2mol/LNaCl溶液40ml,玻璃棒沿一个方向搅拌 (3)析出含DNA的粘稠物:向上述溶液中缓缓加入蒸馏水,并轻轻地沿一个方向搅拌,出现丝状物,当丝状物不再增加时,停止加水(此时NaCl溶液相当于稀释到0.14mol/L) (4)滤取含DNA的粘稠物:用多层纱布过滤,含DNA的粘稠物留在纱布上 (5)DNA粘稠物再溶 20ml2mol/LNaCl溶液 50ml烧杯, 上述粘稠物 缓慢搅拌3 min (6)过滤含DNA的2mol/LNaCl溶液:用2层纱布过滤,滤液中含DNA (7)提取含杂质较少的DNA:上述溶液+95%酒精,缓慢搅拌,出现乳白色丝状物,用玻璃棒将丝装物卷起。 (8)DNA鉴定: 实验关键: 本实验成功的关键是获取较纯净的DNA,因此应注意: 1.充分搅拌鸡血细胞液。DNA存在于鸡血细胞核中。将鸡血细胞与蒸馏水混合以后,应用玻璃棒沿一个方向快速搅拌,使血细胞加速破裂,并释放出DNA 2.沉淀DNA必须用冷酒精。实验前必须准备好大量95%的酒精,并在冰箱中(5℃以下)至少存放24小时。 3.正确搅拌含有悬浮物的溶液。在第(3)、(5)步骤,玻璃棒不要直插烧杯底部,且搅拌要轻缓,以便获得较完整的DNA分子。在步骤(7),要将玻璃棒插入烧杯溶液中间,用手缓慢转动5-10min。 见方法步骤的第6步,差不多就是这个意思~~~